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Post by risingese on Aug 2, 2023 6:29:03 GMT 1
的生化指标。测量肝酶 ALT、AST 和 ALP。X(Chemray 240)按照标准程序进行测量。 石蜡包埋肝切片的免疫荧光和免疫化学染色 按照 H&E 染色方法所述制备石蜡切片。将组织固定在 4% PFA 中。将石蜡切片脱蜡并浸泡在水中。将组织切片放入装有EDTA缓冲液(pH 8.0)的盒子中,在微波炉中进行抗原修复,用组织化学笔圈出,并进行自发荧光猝灭。将 BSA 滴入圆 圈中并孵育 30 分钟。添加一抗,并将切片在湿盒中于 亚洲手机号码列表 4°C 孵育过夜。添加二抗,并将切片在室温弱光下孵育1小时。细胞核用 4,6-二脒基-2-苯基吲哚 (DAPI) 或苏木精复染。将切片稍微干燥后,将抗荧光猝灭密封缓冲液施加到切片上。 通过BrdU掺入法检测体内肝细胞的增殖情况。在对小鼠实施安乐死前3小时,对小鼠腹腔注 射BrdU(B5002,Sigma)溶液(50μg BrdU/g小鼠体重)。接下来,将石蜡切片脱蜡,浸泡在水中,并用柠檬酸缓冲液(pH 6)修复。加入HCl(1N;1mol/L)并将溶液在37℃下加热30分钟以使DNA变性。切片用4%多聚甲醛溶液固定10分钟以防止DNA复性。用组织化学笔圈出切片,并进行自发荧光猝灭。将 BSA 滴入圆圈中并孵育 30 分钟。添加一抗和二抗。用 DAPI 复染细胞核,
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